如何选择同型对照？

同型对照的主要目的是确定一抗的结合是特异性的，而不是非特异性的Fc受体或与其他蛋白的相互作用。还可以用来竞争性的结合抗体，与功能阻断抗体发挥同样的功能。 同型对照要与一抗的来源，Ig分型和标记*一致。 

同型对照（Isotype Control）：使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免疫球蛋白及亚型的免疫球蛋白，用于消除由于抗体非特异性结合到细胞表面而产生的背景染色。如果一抗是多抗，可以用与一抗相同的正常血清。同型对照为免疫荧光标记中的阴性对照。由于荧光标记单抗的组来源不同，应选用相同来源的未标记单抗作为同型对照来调整背景染色。举个例子：比如检测一抗为单抗的mouse anti rat CD11b，clone OX-42 purified IgG，那么它的isotype 是mouse IgG2a， 所以可以用纯化的 mouse IgG2a来做OX-42的同型对照（Isotype Control）。此外，同型对照与单克隆抗体（MoAb）所标记的荧光色素、浓度、F：P比值（标记的荧光色素与免疫球蛋白分子的比值）应该相同为*，这对准确设定阴性与阳性细胞的界标有重要意义，切忌使用与MoAb不相 匹配的同型对照，为同一实验室、采用相同工艺或方法制备（如同一品牌）的产品。

如何选择同型对照 ？

(1)一般选择与一抗的成分*相同种属来源、相同亚型和亚链、相同荧光标记的抗体，比如抗人的CD56 FITC标记的抗体，成份是Mouse IgG1,κ。那么它的同型对照应该是FITC标记的Mouse IgG1,κ。注意同型对照的成份跟它的名称是相同的. 

(2)如果是抗体的组合形式是纯化的一抗＋荧光标记的二抗，那么应该选择一抗的同型对照。比如CD86的纯化抗体，成分是Mouse IgG1,κ。它的同型对照是纯化的Mouse IgG1,κ。它的二抗PE标记的抗小鼠IgG1,。那么染色方式如下：样本管：纯化的CD86＋PE标记的抗Mouse IgG1(二抗)＋样本,同型对照管：纯化的同型对照＋PE标记的抗Mouse IgG1(二抗 )＋样本. 

(3)如果没有找到适合的同型对照，在保持来源相同、荧光标记相同、免疫球蛋白类别相同条件下，那么优先选择的顺序应该是亚链不同--亚型不同--相同类别。比如，某种的抗体的来源是Mouse IgG2b,κ。如果在同型对照表里面找不到*相同的同型对照，那么优先选择相同荧光标记Mouse IgG2a为同型对照。如果也没有找到Mouse IgG2a，那么优先选择相同荧光标记的Mouse IgG2b作为同型对照。如果zui后还是没有找到Mouse IgG2b，那么选者相同荧光标记的Mouse IgG2作为同型对照。